こんにちは．
博士号を取得後，派遣社員として基礎研究に従事しているフールです．
趣味で研究を展開できる，純粋に好奇心を追求できる，そんな「自分だけの研究施設」を作るには，いくらぐらい必要なのでしょうか？
それを考えるために，日々の実験業務にかかる費用を考えています！
本記事では，遺伝子クローニングにかかる費用を計算*してみました．
あなたは，遺伝子クローニングに，どのくらい費用がかかると思いますか？
*ココで使用している数値は，定価・希望小売価格・オープン価格・参考小売価格のどれかです．私の職場が実際に支払っている価格ではありません．
サマリー・約1,000円が，PCRの1回のお値段です．
・約360円が，PCR産物の精製にかかる費用です．
・約7,100円が，クローニングとトランスフォーメーションにかかる費用です．
・約1,400円が，コロニーPCRの1回分のお値段です．
・約2,400円が，ミニプレップとシークエンスにかかる費用です．
遺伝子クローニングのプロトコール
私が行っている遺伝子クローニングのプロトコールは，以下通りです．
- RNA抽出キットの説明書に従ってRNAを抽出する
- RNA濃度を測定する
- cDNA合成キットの説明書に従ってcDNA合成を行う
- PCRキットの説明書に従ってPCRをかける
- 電気泳動で目的サイズの断片が増幅されているか確認する
- 増幅産物を切り出す
- 増幅産物を精製する
- 精製物を遺伝子クローニングキットでクローニングする
- クローニング産物を大腸菌にトランスフォーメーションする
- 大腸菌のコロニーが生えたことを確認する
- コロニーPCRでクローニング産物の有無を確認する
- クローニング産物をもった大腸菌を少量培養する
- ミニプレップ（プラスミド抽出）する
- シークエンスでクローニング産物の配列を確認する
「遺伝子クローニング」と一言で済むことですが，実際はかなりのステップがありますね！
色々なキットも使っているので，費用もそれなりにかかりそうですね…
遺伝子クローニングにかかる費用
上記プロトコールで，私が使用する材料とその費用*は以下の通りです．
RNA抽出およびcDNA合成に掛かる費用に関しては，前回の記事をご覧ください．
それでは本題です．
先ずは最後に1回のPCRにかかるお値段です↓
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| PCRキット | 30,000 | 150 |
| アガロース | 26,000 | 260 |
| TAE | 26,500 | 53 |
| ローディングバッファー | 12,000 | 1.2 |
| サイズマーカー | 17,000 | 170 |
| 染色剤 | 26,000 | 130 |
| 小計 | 137,500 | 764.2 |
| チップ・ピペット類 | 15,700 | 114.5 |
| チューブ類 | 26,400 | 26.4 |
| 小計 | 42,100 | 140.85 |
| 合計 | 179,600 | 905 |
| 合計（税込） | 197,560 | 995.56 |
PCRの1回分のお値段は，約1,000円ということが分かりました！
続いて，切り出し精製にかかる費用です↓
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| 精製キット | 14,000 | 280 |
| チューブ類 | 4,200 | 4.2 |
| チップ・ピペット類 | 28,200 | 40.93 |
| 合計 | 46,400 | 325 |
| 合計（税込） | 51,040 | 357.6 |
PCR産物の精製にかかる費用は，約360円でした．
次に，クローニングとトランスフォーメーションに掛かるお値段です↓
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| クローニングキット | 38,300 | 3,830 |
| チューブ類 | 26,400 | 26.4 |
| チップ・ピペット類 | 28,200 | 32.9 |
| 合計 | 92,900 | 3,889 |
| 合計（税込） | 102,190 | 4,278.2 |
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| コンピテントセル | 21,000 | 2,100 |
| LBプレート | 3,900 | 390 |
| LB（粉末） | 9,000 | 0.72 |
| チューブ類 | 4,200 | 4.2 |
| チップ・ピペット類 | 28,200 | 32.9 |
| コンラージ棒 | 21,250 | 21.25 |
| 合計 | 87,550 | 2,549.07 |
| 合計（税込） | 96,305 | 2,803.98 |
クローニング自体にかかる費用は約4,300円で，それを大腸菌にトランスフォーメーションするお値段は約2,800円でした．
今度は，コロニーPCRに掛かる費用を考えてみましょう↓
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| PCRキット | 9,000 | 113 |
| アガロース | 26,000 | 260 |
| TAE | 26,500 | 53 |
| ローディングバッファー | 12,000 | 1.2 |
| サイズマーカー | 17,000 | 170 |
| 染色剤 | 26,000 | 130 |
| LBプレート | 3,900 | 390 |
| Nuclease free water | 62 | 0.0155 |
| 小計 | 120,462 | 1,117 |
| チップ・ピペット類 | 15,700 | 114.5 |
| チューブ類 | 26,400 | 26.4 |
| つまようじ | 215 | 0.43 |
| 小計 | 42,315 | 141.28 |
| 合計 | 162,777 | 1,258 |
| 合計（税込） | 179,054.70 | 1,384.35 |
コロニーPCRにかかる費用は，約1,400円でした．
最後に，ミニプレップとシークエンスに掛かるお値段です↓
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| 抽出キット | 18,000 | 360 |
| LB（粉末） | 9,000 | 0.72 |
| 蒸留水 | 62 | 10.85 |
| 抗生物質 | 3500 | 70 |
| 小計 | 30,562 | 442 |
| チップ・ピペット類 | 15,700 | 114.5 |
| チューブ類 | 48,700 | 93.2 |
| つまようじ | 215 | 0.43 |
| 小計 | 64,615 | 208.08 |
| 合計 | 95,177 | 650 |
| 合計（税込） | 104,694.70 | 714.62 |
| 材料など | 販売価格（￥） | 1回あたりの費用（￥） |
| シークエンスキット | 5,050,000 | 1,010 |
| 99.5%エタノール | 2,260 | 316.4 |
| ホルムアミド | 7,000 | 5.6 |
| 0.5 M EDTA | 12,000 | 0.006 |
| 3 M 酢酸ナトリウム（pH5.2） | 8,000 | 0.16 |
| Nuclease free water | 62 | 0.016 |
| 小計 | 5,079,322 | 1,332 |
| チップ・ピペット類 | 15,700 | 114.5 |
| チューブ類 | 26,400 | 26.4 |
| つまようじ | 215 | 0.43 |
| 小計 | 42,315 | 141 |
| 合計 | 5,121,637 | 1,473 |
| 合計（税込） | 5,633,800.7 | 1,620.81 |
ミニプレップにかかる費用は約720円で，抽出したプラスミドのシークエンス費用は約1,620円でした．
以上より，遺伝子クローニングにかかる費用は，約14,600円*くらいだと推測できます（RNA抽出やcDNA合成にかかる費用も含みます）．
結構なお値段ですね（笑）．
これは1サンプル分ですから，標的遺伝子が増えてサンプル数が増えるほど，その費用も増えるってことですね…
*濃度測定に掛かる費用（機器代・チップ代など）やプライマー代は含んでいません．
遺伝子クローニングにかかる費用【1か月分】
次に遺伝子クローニングかかる費用を1か月あたりに換算します．
でも，遺伝子クローニングなんて頻繁にはやりません（笑）．
だから仮のお話とします．
もし私が，1か月で4回の遺伝子クローニングを行ったら，どのくらいかかるのでしょうか？
単純計算で，14,600 × 4 ≒ 58,300円
ただ，サンプルとなるRNAは同一の物を使用すると考えた場合，お値段は少し安くなって約51,100円です．
考慮すべきその他の費用
遺伝子クローニングかかる費用を計算してきました．
ただ，材料だけそろえても実験はできません．
実験装置を整える必要があります．
今回の計算には，ピペッター・遠心機・泳動装置・シークエンス機器・パソコンなどの機器類の費用を考慮していません．
毎度のことですが，これらは，1回分という計算ができないので除外しています．
1度そろえれば長期使用可能なので，初期費用という計算になるのでしょう．
いつか，機器類に関して計算してみようと考えています．
ただ，シークエンス機器は1000万円越えだと聞いたことがあるので，あんまり考えたくありません（笑）．
遺伝子クローニングかかる費用【まとめ】
実験にかかる費用として，遺伝子クローニングかかる費用を計算してみました．
1回のクローニング作業で15,000円も使っていましたね．
全て1回で上手くいった場合のお値段ですので，もしココにプライマーの複数設計やPCRの条件検討などを加わった場合は，もっと高くなりますね！
いままでは労力だけを考えてました．
でも今回，お金と労力をかけてクローニングしていることがわかりました．
お金と労力をかけてクローニングした遺伝子の機能が…
これだとモチベーションは下がり放しです（笑）．
最後までお付き合いいただきありがとうございました．
次回もよろしくお願いいたします．
2020年9月14日 フール
